豬痢疾（SD）的病原體是一種革蘭氏陰性的厭氧性螺旋體，先后命名為豬痢
疾密螺旋體、豬痢疾蛇形螺旋體，現(xiàn)在統(tǒng)一命名為豬痢疾短螺旋體（Brachyspira
hyodysenteriae；B．h）。由豬痢疾短螺旋體引起的豬痢疾是一種腸道傳染病，
以黏液性或黏液出血性腹瀉為特征，也被稱之為弧菌性痢疾、血痢、黑痢等。該病
在豬群中的發(fā)病率相當高，病豬生長發(fā)育受阻，耗料增加，給各地養(yǎng)豬業(yè)造成很大
的經(jīng)濟損失。本產(chǎn)品從動物檢疫的實際出發(fā)，建立了 PCR 檢測方法，用于豬痢疾
短螺旋體的快速檢測。它具有下列特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準確快速。
2. 根據(jù)豬痢疾短螺旋體 Nox 基因設計引物，引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強。預期的
PCR 產(chǎn)物長度為 149 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結(jié)果。

運輸及保存:

使用方法:

一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取豬痢疾短螺旋體 DNA。
二、陽性對照
1. 為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體菌做陽性對照，
只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 使用本陽性對照時，由于其濃度較高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。
最好在專門的區(qū)域操作。
三、設置 PCR 反應（25 uL 體系）
3. 在 PCR 管中加入下列成分：
成 份 樣品 陽性對照 陰性對照
B．h 專一性引物一 2 uL 2 uL 2 uL
樣品 DNA 1-5 uL 無 無
B．h 陽性對照 無 2 uL 無
補超純水到 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
即用型 PCR Mix 3.0 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
4. 輕柔混勻后上機，按下面參數(shù)進行 PCR。
過程 溫度 時間
預變性 94℃ 5 min
PCR 反應
（30 個循環(huán)）
94℃ 40 s
55℃ 30 s
72℃ 30 s
延伸 72℃ 1 min
5. 電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 149 bp。