技術(shù)文獻
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一、技術(shù)原理與操作流程
1. 手工洗滌法原理:通過人工操作完成緩沖液沖洗,利用物理拍干去除未結(jié)合物質(zhì)。操作流程:
甩干微孔板內(nèi)液體,拍干殘留液。
注滿緩沖液(如PBST),室溫靜置30秒。
傾棄緩沖液,重復3次,拍干板底。
2. 自動洗板機洗滌法
原理:機械臂完成標準化注液、抽吸和拍干,減少人為干預。
操作流程:
設(shè)置參數(shù)(如注液量250μL/孔,抽吸速度1次/秒)。
機器自動完成注液、浸泡、抽吸循環(huán)3次。
拍干板底,避免液體殘留。
二、技術(shù)參數(shù)對比
1. 手工洗滌法
優(yōu)勢:
靈活性高:適用于小規(guī)模實驗或資源有限場景。
成本低:僅需緩沖液和微量移液器,無設(shè)備購置成本。
局限性:
重復性差:受操作者技能影響,易產(chǎn)生背景信號波動。
效率低:單次洗滌耗時較長,不適合高通量需求。
2. 自動洗板機洗滌法
優(yōu)勢:
一致性佳:參數(shù)標準化,減少人為誤差,結(jié)果重復性好。
效率高:適合大規(guī)模檢測,節(jié)省時間。
局限性:
設(shè)備成本高:需購置和維護洗板機。
殘留量較高:需增加洗滌次數(shù)或優(yōu)化抽吸參數(shù)。
四、選擇建議
手工洗滌法:推薦用于小規(guī)模實驗、預算有限或需靈活調(diào)整洗滌參數(shù)的場景。
自動洗板機洗滌法:適用于高通量檢測、追求結(jié)果一致性和效率的實驗室。
五、通用注意事項
洗滌液配制:使用前溶解鹽結(jié)晶,確保離子濃度穩(wěn)定。
避免氣泡:注液時輕柔操作,保證溶液均勻覆蓋孔底。
拍干控制:手工拍干需垂直用力,洗板機需定期校準吸液高度。
顯色前處理:徹底拍干孔內(nèi)液體,防止背景信號升高。
六、總結(jié)
手工洗滌法以靈活性和低成本見長,適合小規(guī)模實驗;自動洗板機洗滌法以高效性和一致性為核心優(yōu)勢,適用于大規(guī)模檢測。實驗人員需根據(jù)實際需求選擇方法,并嚴格遵循操作規(guī)范,以確保檢測結(jié)果的準確性和可靠性。
1. 手工洗滌法原理:通過人工操作完成緩沖液沖洗,利用物理拍干去除未結(jié)合物質(zhì)。操作流程:
甩干微孔板內(nèi)液體,拍干殘留液。
注滿緩沖液(如PBST),室溫靜置30秒。
傾棄緩沖液,重復3次,拍干板底。
2. 自動洗板機洗滌法
原理:機械臂完成標準化注液、抽吸和拍干,減少人為干預。
操作流程:
設(shè)置參數(shù)(如注液量250μL/孔,抽吸速度1次/秒)。
機器自動完成注液、浸泡、抽吸循環(huán)3次。
拍干板底,避免液體殘留。
二、技術(shù)參數(shù)對比
三、性能與適用性
1. 手工洗滌法
優(yōu)勢:
靈活性高:適用于小規(guī)模實驗或資源有限場景。
成本低:僅需緩沖液和微量移液器,無設(shè)備購置成本。
局限性:
重復性差:受操作者技能影響,易產(chǎn)生背景信號波動。
效率低:單次洗滌耗時較長,不適合高通量需求。
2. 自動洗板機洗滌法
優(yōu)勢:
一致性佳:參數(shù)標準化,減少人為誤差,結(jié)果重復性好。
效率高:適合大規(guī)模檢測,節(jié)省時間。
局限性:
設(shè)備成本高:需購置和維護洗板機。
殘留量較高:需增加洗滌次數(shù)或優(yōu)化抽吸參數(shù)。
四、選擇建議
手工洗滌法:推薦用于小規(guī)模實驗、預算有限或需靈活調(diào)整洗滌參數(shù)的場景。
自動洗板機洗滌法:適用于高通量檢測、追求結(jié)果一致性和效率的實驗室。
五、通用注意事項
洗滌液配制:使用前溶解鹽結(jié)晶,確保離子濃度穩(wěn)定。
避免氣泡:注液時輕柔操作,保證溶液均勻覆蓋孔底。
拍干控制:手工拍干需垂直用力,洗板機需定期校準吸液高度。
顯色前處理:徹底拍干孔內(nèi)液體,防止背景信號升高。
六、總結(jié)
手工洗滌法以靈活性和低成本見長,適合小規(guī)模實驗;自動洗板機洗滌法以高效性和一致性為核心優(yōu)勢,適用于大規(guī)模檢測。實驗人員需根據(jù)實際需求選擇方法,并嚴格遵循操作規(guī)范,以確保檢測結(jié)果的準確性和可靠性。
