PrimaCell?人少突膠質(zhì)細(xì)胞試劑盒培養(yǎng)方法

PrimaCell?人少突膠質(zhì)細(xì)胞試劑盒培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

HCT-8/FU人結(jié)腸癌氟尿嘧啶耐藥株
COC1/DDP人卵巢癌順鉑耐藥株
BEL/FU人肝癌耐氟尿嘧啶細(xì)胞株
HCT-8/TAXOL人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株
A2780/TAXOL人卵巢癌紫杉醇耐藥株
LOVO/ADR人結(jié)腸癌阿霉素耐藥株
HCT-8/VCR人結(jié)腸癌長春新堿耐藥細(xì)胞株
PATU8988/FU人胰腺癌氟尿嘧啶耐藥株
Hela/TAXOL人宮頸癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株
Bxpc3/DDP人胰腺腫瘤順鉑耐藥株
Hela/DDP人宮頸癌順鉑耐藥株
CNE2/DDP人鼻咽癌順鉑耐藥株
A375/DDP人惡性黑色素瘤順鉑耐藥株
HT-29/DDP人結(jié)直腸腺癌順鉑耐藥株
SMMC7721/DDP人肝癌順鉑耐藥株
SK-MES-1/DDP人肺鱗癌順鉑耐藥株
T-24/DDP人膀胱移行細(xì)胞癌耐順鉑細(xì)胞株
A549/DDP人肺癌順鉑耐藥株
SGC7901/DDP人胃癌順鉑耐藥株
K562/ADR人白血病阿霉素耐藥株
A549/TAXOL人肺癌紫杉醇耐藥株
MCF7/Taxol人乳腺癌紫杉醇耐藥株
SMMC-7721/Sorafenib人肝癌索拉非尼耐藥株
Huh-7/Sorafenib人肝癌索拉非尼耐藥株
A549/吉非替尼耐藥株人肺癌吉非替尼耐藥株
SGC7901/V人胃癌長春新堿耐藥
A2780/V人卵巢癌長春新堿耐藥株
HCT8/V人結(jié)腸癌長春新堿耐藥株