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PCR檢測試劑盒

人雄激素受體基因多態性檢測試劑盒

文字:[大][中][小] 2024-3-19    瀏覽次數:269    
商品屬性
產品名稱 規格 貨號
人雄激素受體基因多態性檢測試劑盒
50T
YS-P015224
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光。
有效期:一年

貨期:現貨PCR試劑盒的有效期一般為1年,這是指在適當的儲存溫度下。核酸擴增部分的試劑一般要貯存于-20℃下,產物檢測部分試劑則貯存于2-8℃。盡量避免反復凍融。


【結果分析條件設定】
u 基線(Baseline)設定:應選擇該次實驗指數擴增前所有樣本熒光信號比較穩定的一段區域(所有樣本熒光信號無較大波動),起始點(Start)應避開熒光采集起始階段的信號波動,終止點(End)應比最早出現指數擴增的樣本Ct值減少1~3個循環,建議基線設為6~15。
u 閾值(Threshold)設定:將閾值線設定在剛好超過正常陰性質控品擴增曲線的最高點。
【質控標準】
1.   陰性質控品的檢測結果應為陰性,無指數擴增期,Ct=40或無Ct;
2.   陽性質控品的檢測結果應為陽性,有明顯的指數擴增期,Ct值應小于等于35;
3.   以上要求需在一次實驗中同時滿足,否則該次實驗視為無效。
【結果判斷】
1.   陽性:有明顯的指數擴增期,且Ct<38;
2.可疑:有明顯的指數擴增期,且38≤Ct<40,此時樣本為可疑樣本;對于可疑樣本建議復核一次,若復核結果Ct<40且有指數擴增期,則判定為陽性,否則判定為陰性;
3.   陰性:無指數擴增期,Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
【對檢驗結果的解釋】
1.   實驗室環境污染、試劑污染、樣品交叉污染會出現假陽性結果;

2.   試劑運輸、保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,可能會導致出現假陰性結果。


PCR反應的特異性:
   ①引物與模板DNA特異正確的結合;
   ②堿基配對原則;
   ③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
   ④靶基因的特異性與保守性。
人雄激素受體基因多態性檢測試劑盒其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。
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