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PCR檢測試劑盒

大腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒

文字:[大][中][小] 2024-3-14    瀏覽次數:306    
商品屬性
產品名稱 英文名稱 貨號
大腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒
Campylobacter coliPCR
YS-P013974
規格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光。
有效期:一年

貨期:現貨PCR試劑盒的有效期一般為1年,這是指在適當的儲存溫度下。核酸擴增部分的試劑一般要貯存于-20℃下,產物檢測部分試劑則貯存于2-8℃。盡量避免反復凍融。

【結果分析條件設定】
u 基線(Baseline)設定:應選擇該次實驗指數擴增前所有樣本熒光信號比較穩定的一段區域(所有樣本熒光信號無較大波動),起始點(Start)應避開熒光采集起始階段的信號波動,終止點(End)應比最早出現指數擴增的樣本Ct值減少1~3個循環,建議基線設為6~15。
u 閾值(Threshold)設定:將閾值線設定在剛好超過正常陰性質控品擴增曲線的最高點。
【質控標準】
1.   陰性質控品的檢測結果應為陰性,無指數擴增期,Ct=40或無Ct;
2.   陽性質控品的檢測結果應為陽性,有明顯的指數擴增期,Ct值應小于等于35;
3.   以上要求需在一次實驗中同時滿足,否則該次實驗視為無效。
【結果判斷】
1.   陽性:有明顯的指數擴增期,且Ct<38;
2.可疑:有明顯的指數擴增期,且38≤Ct<40,此時樣本為可疑樣本;對于可疑樣本建議復核一次,若復核結果Ct<40且有指數擴增期,則判定為陽性,否則判定為陰性;
3.   陰性:無指數擴增期,Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
【對檢驗結果的解釋】
1.   實驗室環境污染、試劑污染、樣品交叉污染會出現假陽性結果;

2.   試劑運輸、保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,可能會導致出現假陰性結果。

PCR反應的特異性:
   ①引物與模板DNA特異正確的結合;
   ②堿基配對原則;
   ③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
   ④靶基因的特異性與保守性。
大腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。
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