皮里陶病毒RT-LAMP試劑盒使用方法

皮里陶病毒RT-LAMP試劑盒使用方法:

一、皮里陶病毒RT-LAMP試劑盒50次稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。

1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。

3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。

二、樣品 DNA 的制備

7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。

8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。

三、設置 qPCR 反應（20μL 體系，在樣品制備室進行）

9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。

Herba houttuyniae魚腥草染料法PCR鑒定試劑盒
Herba houttuyniae魚腥草探針法PCR鑒定試劑盒
Herba leonuri益母草LAMP鑒定試劑盒
Herba leonuri益母草PCR鑒定試劑盒
Herba leonuri益母草染料法PCR鑒定試劑盒
Herba leonuri益母草探針法PCR鑒定試劑盒
Herba lobeliae chinensis半邊蓮LAMP鑒定試劑盒
Herba lobeliae chinensis半邊蓮PCR鑒定試劑盒
Herba lobeliae chinensis半邊蓮染料法PCR鑒定試劑盒
Herba lobeliae chinensis半邊蓮探針法PCR鑒定試劑盒
Herba lophatheri淡竹葉LAMP鑒定試劑盒
Herba lophatheri淡竹葉PCR鑒定試劑盒
Herba lophatheri淡竹葉染料法PCR鑒定試劑盒
Herba lophatheri淡竹葉探針法PCR鑒定試劑盒
Herba lycopi澤蘭LAMP鑒定試劑盒
Herba lycopi澤蘭PCR鑒定試劑盒
Herba lycopi澤蘭染料法PCR鑒定試劑盒
Herba lycopi澤蘭探針法PCR鑒定試劑盒
Herba lycopodii伸筋草LAMP鑒定試劑盒